Funakoshi
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Funakoshi Co., Ltd a contribué à distribuer des réactifs et des instruments de recherche pour les chercheurs dans les domaines des sciences de la vie depuis sa fondation. La mission de cette entreprise est de fournir un large éventail de produits :
En savoir plus :
Site internet : www.funakoshi.co.jp
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PCR Conventionnelle
La PCR (Polymerase Chain Reaction) est un test in vitro pour la réplication de l'ADN qui permet à une séquence "cible" d'ADN d'être sélectivement amplifiée plusieurs millions de fois en quelques heures.
Une réaction de PCR classique nécessitent différents composants et réactifs. Ces composants inclus :
- Echantillon d'ADN contenant la région d'ADN (Cible) à amplifier
- ADN polymerase, qui doit être résistante à la température pour pouvoir rester intacte pendant le processus de dénaturation de l'ADN
- 2 amorces (primers) qui sont complémentaires des extrémités 3' des brins sens et anti-sens de l'ADN cible (l'ADN polymérase peut uniquement se lier et procéder à l'élongation d'un double brin d'ADN et sans les amorces l'élongation est impossible)
- Desoxynucléotides triphosphate (dNTP), qui représentent les briques de construction nécessaire à l'ADN polymérase pour synthétiser un nouveau brin d'ADN
- Solution tampon, qui apporte un environnement chimique suffisant pour une activité et une stabilité optimale de l'ADN polymérase
- Cations bivalents, ions magnésium ou manganèse. Généralement se sont les ions Mg2+ qui sont utilisés mais les ions Mn2+ peuvent également être utilisés pour la mutagenèse
- Ions potassium monovalents
 | Typiquement, la PCR consiste en une série de 20-40 changements de température, appelés cycles. Chaque cycle consiste en 2-3 étapes à températures différentes. Les cycles sont précédés par une étape à haute température (>90 °C), et suivis une étape finale d'extension. Les températures utilisées ainsi que le temps appliqués à chaque cycle dépendent de plusieurs paramètres. Ceci inclu l'enzyme utilisée pour la synthèse de l'ADN, la concentration des ions divalents et des dNTPs et la température d'hybridation (Tm) des amorces.
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